GRAM POZITÍV ÉS GRAM NEGATÍV ANAEROB BAKTÉRIUMOK GRAM POZITÍV SPÓRAKÉPZŐ PÁLCÁK
DR. Ghidán Ágoston 2014.10.13.
A humán anaerob normál flóra
• bőrön, szájüregben, hüvelyben, emésztő traktusban Bőr • habár állandóan levegővel érintkezik az anaerobok jelen vannak • dominánsak az 'anaerob diphtheroidok' – propionibacteriumok
Szájüreg • anaerobok megtalálhatóak: – a mandulák és a nyelv kriptáiban – gingiva tasakoban, plakkokban – újszülöttekben is megtalálható de a számuk akkor nő meg amikor a fogak áttörnek A leggyakoribbak: – Prevotella, Fusobacterium, Peptostreptococcus, Veillonella, és néhány anaerob Gram-pozitív pálca
Mintavétel és tenyésztés • az anaerobok érzékenyek az oxigénre – de nem egyformán • Bacteroides fragilis és Clostridium perfringens 2-4 % O2 elvisel • anaerob tenyésztésre alkalmas minta: váladékok, szövetdarabok • mintavételkor és szállításkor kerülni kell az O2 való érintkezést • száraz vattatampon nem megfelelő
Metronidazol: csak anaerobok ellen hatásos - legtöbb baktérium érzékeny – növekvő rezisztencia!!! ß-Laktám antibiotikumok - az anaerobok penicillinre érzékenyek - B. fragilis penicillin rezisztens – rezisztens még: ampicillin, amoxycillin, piperacillin, - imipenem és meropenem lehet ellenük hatásos - ß-laktamáz gátlóval kombinálva a B. fragilis ellen hatásos
Clindamycin: a legtöbb anaerob érzékeny rá Chloramphenicol: hatásos szintén az anaerobokra Erythromycin, co-trimoxazole, tetracyclinek: hatásosak Glycopeptidek, aminoglycosidek és quinolonok: hatástalanok Kezelés - elhalt szövetek eltávolítása - drainezés, tályogok megnyitása Megelőzés: kemoprofilaxis: cefuroxime vagy metronidazol
Genus
Anaerob baktériumok Anatómiai hely
Gram-negatív anaerob - Gram-negatív pálca: - Bacteroides sp. - Prevotella sp. - Porphyromonas sp. - Fusobacterium sp. - Gram-negatív coccus - Veillonella
Vastagbél Szájüreg Szájüreg Szájüreg, vastagbél
Szájüreg, vastagbél
Bacteroides • vékony pálca vagy coccobacillus • normál bélflóra tagja • a normál székletben 1011 B. fragilis/g található Betegségek: endogén eredet • peritonitis, decubitus, tályogok • azonosítás: biokémiai reakciók alapján, gázkromatográfiával, MALDI-TOF
Prevotella
• keskeny pálca vagy coccobacillus • általában felsőlégúti megbetegedésekből izolálható • P. bivia, P. disiens női urogenitális traktusban megtalálható
• agytályog, tüdőtályog, empyema
Porphyromonas • szájüreg normál flórájához tartozik • megtalálható szájüregi tályogokban, melltályogokban, perianális és húgyúti infekciókban
Fusobacterium nucleatum • szivar alakú pálcák • kénhidrogént, vajsavat és propionsavat termel • szájüregi infekciókból izolálható
Akut nekrotizáló ulcerativ gingivitis • Plaut-Vincent angina, fusospirochaetosis • a fogíny és a bucca érintve van • tünetek: fájdalmas, vérző fogínyek, néha álhártyával felrakott • bűzös lehelet • Gram festéssel igazolható
Veillonella • Gram-negatív coccusok • normál szájflóra és bélflóra tagja • hasznos baktériumnak tartják • tejsavat gyengébb savakra bontja Fontosabb speciesek: V. parvula, V. dispar, V. atipyca
Gram-pozitív anaerobok • Gram-pozitív pálcák - Actynomyces Szájüreg - Lactobacillus Hüvely - Propionibacterium Bőr - Eubacterium, Bifidobacterium, Arachnia Szájüreg, vastagbél - Clostridium Vastagbél, talaj • Gram-pozitív coccus - Peptostreptococcus Vastagbél
Actinomyces A genus több speciest is tartalmaz: A. bovis (állatpatogén); A. naeslundii, A. odontolyticus, A. viscosus - ritkán okoznak betegséget és a normál szájflóra tagjai A. israelii a legjelentősebb humán patogén
Morfológia, biokémiai tulajdonság: • Gram-pozitív, karcsú pálca, gyakran fonal alakú • Szövetekben sárgás tőkéket képez, amely kisebb baktériumtömegeknek felel meg. Anaerob baktérium, lassan szaporodik
Patogenitás: • az actinomycosis - endogén eredetű fertőzés • sérülés, gennyes folyamatok elősegítik kialakulását, melynek három megjelenési formája van: cervicofacialis: az arcra és a nyakra lokalizálódik, fognyak-, gyökér caries, gingivitis, caries progresszíva, zománc demineralizáció, plakk
thoracalis: főleg tüdőfolyamatokat jelent abdominalis: az appendix és a coecum krónikus gyulladásaként jelentkezik - betegség helyén a szövetek duzzadtak - a terület deszkakemény tapintású és a sipolyokból sűrű genny ürül Diagnózis, terápia: - gennyből Gram-festés, tőkék kimutatása - sebészi feltárás mellett penicillin + szulfonamid kombináció
Propionibacterium • 4 species: P. acnes P. propionicum • Morfológia: G + pleomof pálca • Tenyésztés : anaerob véres agar proteáz, lipáz, hisztamin, porfirin termelés • Klinikai kép:** acne vulgaris **carbunculus, phlegmone, sepsis ** dentoalveoláris infekció, dentális plakk • Terápia: tetracyclin, clindamycin
Eubacterium • pleomorf baktériumok • fontosabb speciesek: E. brachy, E. nodatum • a bélflórában megtalálhatóak • tályogokból izolálhatóak • E. yurii kukoricacső alakzatot képez
Lactobacillus acidophilus Szájüregben normál flóra (sok species) cukor -- tejsav -- fogzománc károsodik -caries Hüvelyben normál flóra (Döderlein pálca) savi pH védelem kórokozókkal szemben Tenyésztés: Rogosa táptalajon
Mikrobiológiai teszt a caries rizikó felmérésére • Lactobacillus és Streptococus mutans csíraszám meghatározás nyálban, dentális plakk-, vagy interdentális terület váladékában • A minta higításainak szélesztése: Rogosa-, Mitis - Salivarius agarra - csíraszámolás • Magas caries hajlam: Streptococcus mutans CFU 1,OOO.OOO/ ml Lactobacillus CFU 1OO.OOO/ ml
Bifidobacterium • 8 species: B. dentocariosa • Morfológia: G+ bunkós végű pálca, láncban • Tenyésztés: anaerob véres agar • Előfordulás: száj-, bél-, vagina flóra, csecsemők bélflórája---kolonizációs rezisztencia • Klinikai kép: caries ? perodontális betegségek? • Probiotikum
SZÁJÜREGI INFEKCIÓK CAPNOPHIL KÓROKOZÓI
Actinobacillus actinomycetemcommitans • • • •
Előfordulás: szájüreg normál flórája Morfológia: G- coccobacillus Tenyésztés: véres agar, CO2 atmoszféra Virulencia faktorok: leucotoxin IgA proteáz, kollagenáz
• Klinikai kép: **agresszív parodontitis **destruktiv periodontitis **abscessus, osteomyelitis
Eikenella corrodens • Morfológia: G+ karcsú, kicsi pálca • Tenyésztés: véres agarba „süllyed „ CO2 atmoszféra • Előfordulás: szájüreg normál flóra
• Klinikai kép: szájüregi gennyes folyamatok
Capnocytophaga • Morfológia: G +/- pálca • Tenyésztés: véres agar, CO2 atmoszféra
• Előfordulás: subgingivális normál flóra • Klinikai kép: gingivitis, parodontitis, osteomyelitis
Bacillus, Clostridium
Gram-pozitív spóraképző pálcák Aerob Anaerob Bacillus B. anthracis B. cereus
Clostridium C. botulinum C. perfringens C. difficile C. tetani
Bacillus anthracis Morfológia: - csilló nélküli pálca - 4-5m hosszú - rövid láncokat alkot (bambusznád) - spórát képez (élő szervezetben nem) - spóraképzés 15C-on
Tenyésztés: • aerob • 12-45C-on növekszik • spórát oxigén jelenlétében képez • telepei sugárirányba nőnek, medúzafőhöz hasonlítanak • véres agaron nem hemolizál • leves táptalajban vattaszerű üledéket képez
Ellenálló képesség: • spórák ellenállóak • Gruinard szigetén (Skócia) 1942 és 1943 között spórát tatrtalmazó bombát robbantottak – kísérleti célból (robbanástól a spóra nem pusztul el) • 1986-ig a spórák életképesek maradtak – talajcserét és formaldehides dekontaminációt végeztek
Virulencia faktorok: • két plazmid • toxinokat kódol • poly-D-glutaminsav tok – antifagocita hatású
• Exotoxinjai: – letális faktor - nekrotoxin – ödéma faktor – kalmodulindependens adenilcikláz – protektiv antigén
Bacillus anthracis - Epidemiológia
Patogenitás: • spórák germinációja a bejutás helyén majd haemorrhagias gyulladás a szövetekben ödéma képződéssel Patogenitás feltétele: - tokképzés (antifagociter hatás) - Exotoxinok termelése
Fertőzés forrása: • főleg növényevő állatok: kecske, juh, szarvasmarha, antilop, zsiráf, zebra • dögevők, ragadozók – nem betegszenek meg • boncolással, nyúzással, test darabolásával – a spórák a környezetbe kerülnek
• direkt kontaktus – bőranthrax • inhalációval – tüdőanthrax • elfogyasztással – oropharyngealis, gastrointestinalis anthrax Toxin hatására: • vérbőség, ödéma Bőranthrax - pokolvar: • bőrsérülés - papula – vesicula - pustula ulcus - pustula maligna – nyirok - vér halál
Oropharyngealis: • álhártya képződés a garatban Bélanthrax: • emberben: hasmenés, mely alig véres
Immunizálás: • Mo: csak háziállatokat, élő attenuált baktériummal immunizálják • USA: katonák immunizálása – alegység vakcina – öböl szindróma? • Kína, Oroszország: élő, attenuált Terápia: penicillin, tetracyclin, ciprofloxacin
Szaprofita bacillusok Ritkán okoznak emberi megbetegedést B. cereus
Jellemzői: • nagy pálcák láncokban • szabálytalan szélű fénytelen telepek • tok nincs • véres agaron - béta-hemolizáló
• ételmérgezés (enterotoxin) • 2 féle toxin: – hányással járó (hőrezisztens) - 1-6 óra múlva – hasmenéssel járó (hőérzékeny) - 1-24 óra lappangás
Diagnosztika: • az ételben 105/g B. cereus
Terápia: • tüneti kezelés • Sebfertőzés esetén: Vancomycin, Clindamycin, Fluoroquinolon B. stearothermophilus – hőlégsterilizáló, autokláv működésének ellenörzése
Clostridiumok közös jellemzői
• Gram - pozitív pálcák: orsó alakú • anaerobok • spórások: a spóra deformálja a baktériumsejteket • elhelyezkedésük species specifikus • peritrich csillósak – kivéve C. perfringens (tokot termel) • legtöbb species talajban megtalálható • állatok, emberek bélcsatornájának normál flórájának tagjai
CLOSTRIDIUM TETANI
Bevezetés: • 1 millió estet közöltek 1975-ben • az újszülöttkori halálozási aránya 90% • Heted napos halál • Magyarországon – az 1950-es évek elején - 500 megbetegedés évente – újszülöttekben 40%-os, idősebb korban 80%-os halálozással – 2007-ben 3 ember halt meg tetanusban (1941 előtt születtek, és védőoltást nem kaptak)
Újszülöttkori tetanus becsült halálozási aránya (1991-ben 1000 lakosra vetítve)
kevesebb mint 1
1-5
több mint 5
Jelentett tetanusos esetek a trópusi régiókban (1990-1995)
Clostridium tetani Morfológia: • Gram-pozitív pálca • végálló spóra – dobverő alak • peritrich csillós - mozgékony Tenyésztés: • obligát anaerob • Holman, Brewer táptalajon, 3-4 napig Antigén szerkezet: • csilló alapján 10 típus (de azonos toxin) Exotoxinok: • tetanospazmin • tetanolizin Patogenitás: • Tetanus - merev görcs Spóra bejutása: • sérülésen át, köldökcsonkon át, …
Szaporodás: • elhalt szövetekben • toxin termelés • nincs bakteriémia csak toxémia • tetanopasmin - központi idegrendszer károsodik Fertőzés módja: • talajspórával • szülés • kriminális abortusz • égési sérülés, köldökcsonk fertőzés Terápia: • sebkimetszés • antitoxin HTIG • tetanus toxoid • penicillin, relaxánsok, nyugtatók • mesterséges lélegeztetés Prevenció: toxoid a DaPT vakcinában
Clostridium botulinum Morfológia: • Gram-pozitív pálca • spórák subterminálisan vagy centrálisan helyezkednek Tenyésztés: • véres agaron, avas szagú telepek Antigén szerkezet: • exotoxint termel – lysogen konverzió • 8 típusú toxin: A-H • A, B, E ember patogén
Patogenitás: • botulizmus - hurkamérgezés • spóra élelmiszerbe jut • germináció, szaporodás és toxintermelés • az exotoxin neurotoxikus: gátolja az acetilkolin felszabadulását a szinapszisokban • 1-2 ng már halálos - intravénásan • petyhüdt bénulás
Tünetek: • órák, napok múlva: – kancsalság, kettős látás, pupillatágulat – nyelés és beszédzavar – szájszárazság – légzésbénulás majd halál – gastroenteritises tünetek lehetnek – a beteg tudata végig tiszta – láz nincs
Csecsemőkori botulizmus
• 6 hó alatt a spórák a bélcsatornába kerülve elszaporodnak • in vivo toxint termelnek • leggyakoribb forrás: méz Nagyon ritkán seb botulizmus • törések során, kábítószer bevitel: inhalációval, tűvel
Diagnosztika: - toxin kimutatása (ételből, hányásból, serumból) - állatoltás - neutralizációs próba - toxinkimutatás szérumból (agglut., RIA) Terápia: - polivalens savó (A, B, E) - 80000 egység antitoxin gyorsan - mesterséges lélegeztetés - évente 10-20 eset
Clostridium difficile • antibiotikum kezelés hatására a bélben élő rezidens flóra elpusztul • C. difficile elszaporodik Morfológia: • Gram-pozitív pálca • centrális spóra Toxinokat termel: toxin A: enterotoxin toxin B: cytotoxin toxin A: pseudomembranosus colitis (epithelium elhalás, microabsesusok, megacolon)
Tünetek: • véres hasmenés • görcsös hasi fájdalom • láz Diagnosztika: • toxinkimutatás székletből (latex agglutinációval, ELISA) Terápia: • Metronidazol • Vancomycin
Gázgangréna clostridiumok C. perfringens – 90% C. novyi C. septicum C. perfringens • Gram-pozitív spórás pálca • spóra centrálisan helyezkedik el • csillótlan, nem mozog • véresagaron kettős hemolítikus udvar veszi körül
Termelt toxinok és enzimek • Major lethális toxinok – Alpha (α) – lecitináz (vvt, fvs károsít, beta (β), epsilon (ε), iota (ι) – Enterotoxin
• Minor lethális toxinok – Delta (δ), teta (τ), kappa (κ), lambda (λ), mu (μ), nu (ν)
• Enzimek – Neuraminidáz, DNáz, kollagenáz, proteáz hialuronidáz, lipáz – CO2, H2S, metán
• Típusba sorolás a toxin termelése alapján: A, B, C, D, E
Kórképek • Gázgangréna – endogén: bélruptúra, perforáció, appendicitis után kerül a hasüregbe – exogén: spórákat tartalmazó földdel szennyeződik a seb – roncsolt sérülés
• Ételmérgezés • Enteritis necrotisans • Sepsis
Terápia: • sebellátás • antitoxin (polivalens) • Penicillin Ételmérgezés: • fertőzés forrása: húskészítmények • hőérzékeny enterotoxint termel • A-típusú enterotoxint termelő variáns: hasmenés, hányás, láz, spontán gyógyul Enteritis necrotisans: • C-típus: sertés béltartalmával fertőzött hús (nem kellően hőkezelt) - bélfal necrosis, perforatio, halál
