Gram-negatív fakultatív anaerob pálcák (Enterobacteriaceae) Dr. Szabó Dóra Egyetemi adjunktus Semmelweis Egyetem Orvosi Mikrobiológiai Intézet 2008. november 20.
1
Gram-negatív fakultatív anaerob pálcák (Pozitív glükóz fermentáció)
Oxidáz pozitív
Vibrioneceae
Oxidáz negatív
Aeromonadaceae
Enterobacteriaceae
Fakultatív patogén
Vibrio
2008. november 20.
Plesiomonas
Aeromonas
Escherichia Klebsiella Enterobacter Proteus Serratia Providencia Morganella Edwardsiella Citrobacter Hafnia
Obligát patogén
Salmonella Shigella Yersinia
2
1
Enterobacteriaceae
Fakultatív anaerobok Ha motilisak, peritrich csillójuk van Sok közülük ember és más állat bélrendszerének normál flórájának tagja Több enterális pathogén, illetve húgyúti vagy légúti kórokozó Elkülönítésük biokémiai reakciókkal és antigén szerkezeti különbségek alapján
2008. november 20.
3
Enterobacteriaceae
Morfológia és általános jellemzés Gram-negatív, nem-spórás, pálca alakú baktériumok Oxidáz – Glükózt fermentálják, gáz termeléssel vagy anélkül (aerogenic - anaerogenic) Nitrátot nitritté redukálja (néhány kivétel van)
2008. november 20.
4
2
Enterobacteriaceae
Sejtes O antigén – ez a hı stabil polysaccharid része a LPS-nek. Sima és durva felszínő telepek az O antigén jelenlétével vagy elvesztésével van összefüggésben.
Csilló H antigénjei – hı labilis
Tok K antigénjei – elfedi a felszíni O antigént és az O specifikus antiszérum az agglutinációt gátolja. 15 perces forralás elpusztítja a K antigént és felszínre hozza az O antigéneket. A K antigént Vi (virulencia) antigénnek hívják Salmonella-ban.
2008. november 20.
5
Fig. 20.p607
2008. november 20.
6
3
Enterobacteriaceae Osztályozás - több mint -15 különbözı törzs
Escherichia Shigella Edwardsiella Salmonella Citrobacter Klebsiella Enterobacter Hafnia Serratia
Proteus Providencia Morganella Yersinia Erwinia Pectinobacterium
2008. november 20.
7
Escherichia coli Normál bélflóra tagja Morfológia: 2-4 µm, Gram-negatív csillós pálca Tenyésztés: igénytelen, közönséges agar és eozin-metilénkék táptalajon Biokémiai tulajdonságok: glukóz +, laktóz +, indol +, ureáz –, H2S – Antigén szerkezete: “O” 174 “H” 55 “K” 100 féle 2008. november 20.
8
4
E. coli
2008. november 20.
9
Klebsiella pneumoniae normál bélflóra tagja Patogenitás: lebenyes tüdıgyulladás (Friedländer-pneumonia) húgyúti, epe, arcüreg, középfül gyulladás Klebsiella oxytoca: iatrogén Klebsiella ozaenae orrnyálkahártya gyulladás ESBL! 2008. november 20.
10
5
Encapsulated Klebsiella by india ink staining (negative staining)
2008. november 20.
11
Klebsiella pneumoniae
2008. november 20. Mucoid telepek – tok
12
www.icbm.de
6
Biokémiai identifikálás: Laktóz (+), ureáz (+), indol (-), H2S (-), citrát (+) Szerológiai identifikálás: Neufeld`s tokduzzadási reakció (Quellung) a különbözı szerotípusok detektálása a tokantigének elleni specifikus ellenanyagok segítségével. Fágtípizálás: csak epidemiológiai vizsgálatokra. Kezelés és megelızés Antibiotikumok: az érzékenység alapján, β -laktám+ β-laktmáz gátló kombinácó, 3. generációs cephalosporinok 2008. november 20.
13
Extended-spectrum betalactamase (ESBL) kiterjedtspektrumú béta-laktamáz termelés
Hidrolizálja: 1., 2. és 3. gen cephalosporinokat NEM hidrolizálja: karbapenemeket monobaktámot A enzim gátolható klavulánsavval, szlbaktámmal és tazobaktámmal LEGGYAKORIBB REZISZTENCIA MECHANIZMUS GRAM-NEGATÍV NOZOKOMIÁLIS BAKTÉRIUMOKBAN
2008. november 20.
14
7
Enterobacter spp.
Normál bélflóra Klinikai jelentıség
Nozokomiális fertızések Bakterémia égett betegekben
2008. november 20.
15
Enterobacter cloacae Klebsiella pneumoniae Mucoid telepek 2008. november 20.
16
8
Proteus, Providencia, és Morganella
Mind a normál bélflóra tagja (kivéve Providencia). Mind motilis, Proteus rajzik Urea + többnyire, erısen + a Proteus TSI változó Indol – csak a P. mirabilis -
2008. november 20.
17
Proteus, Providencia és Morganella
Virulencia faktorok
Ureáz – az ammónia termelés károsíthatja a húgyútak epithelialis sejtjeit
Klinikai jelentısége
Húgyúti infekciók, pneumonia, septicemia, és sebfertızések
2008. november 20.
18
9
Proteus genus Morfológia: Gram-negatív pálca peritrich csillós - rajzás Tenyésztés: igénytelen (lemez agaron is kinı!) rajzás lemez agaron, véres, csoki agaron, de EMK táptalajon gátolt a rajzás! Patogenitás: nosocomiális infekciók sebfertızés—postoperativ urogenitális Weil-Felix reakció: Proteus OX19 törzs heterofil antigénje a Rickettsiákkal reakciót ad tífusz diagnózis)
(kiütéses
2008. november 20.
19
A: Proteus, Providentia – B: Ureáz Test - / +
2008. november 20.
20
10
Serratia (S. marscescens, S. liquefaciens) Gyakori opportunista patogén (pneumonia etc.)
• Egy szabadon élı szaprofita Motilis Urea +/Húgyúti és légúti fertızéseket okoz Számos antibiotikumra rezisztens
2008. november 20.
TSI Medium
21
Identification
2008. november 20.
22
pathmicro.med.sc.edu
11
helios.bto.ed.ac.uk
Top row, Proteus vulgaris; second row, unidentified enteric bacterium; third row, Klebsiella pneumoniae; bottom row, Vibrio alginolyticus.
2008. november 20.
23
A gyomor bélrendszer normál baktérium flórája
Jelentıség:
Gyomor (103–106 cfu/g)
csíramentes állatokkal végzett kutatások
Vékonybél (105–107 cfu/g)
alacsony pH Rezidens mikroflóra Ø Tranziens flóra + Anaciditás, pangás ⇒ Lactobacillus (Boas-Oppler) és Sarcina spp. Emésztı enzimek és epe hatása, gyors perisztaltika Rezidens mikroflóra Ø Tranziens flóra +
Vastagbél (109–1011 cfu/g)
Bıséges rezidens mikroflóra
2008. november 20.
24
12
A vastagbél normál baktérium flórája felnıttekben (>400 faj)
Anaerobok
A fajok 90–95%-a ∼ 1011 cfu/g széklet Rezidens Bifidobacterium bifidum Bacteroides fragilis Eubacterium spp. Clostridium spp. Tranziens Proprionibacterium spp. Peptostreptococcus spp.
Fakultatív anaerobok A fajok 5–10%-a ∼ 103–109 cfu/g széklet Rezidens
Escherichia coli Enterococcus spp.
Tranziens
Klebsiella spp. Enterobacter spp. Proteus spp. Providencia spp.
2008. november 20.
25
A vastagbél normál baktérium flórája csecsemıkben
Anyatejes táplálás
Rezidens Lactobacillus bifidus Más speciesek elszaporodása gátolt (K-vitamin pótlás!)
Vegyes táplálás
Elıször Fakultatív anaerobok Késıbb Bacteroides fragilis
2008. november 20.
26
13
Patkány colon mucosajának scanning elektronmikroszkópos képe
Nagyítás: 262×
Nagyítás: 2.624×
: baktérium réteget, L: lumen, B: baktériumok, T: intestinalis szövet 2008. november 20.
27
A vastagbél normál baktérium flórájának jelentısége
Tápanyagok, epefestékek lebontása Vitaminok termelése: K- és B-vitaminok Gázképzés ⇒ bélfal feszülés ⇒ perisztaltika Állandó stimulus ⇒ a mucosa folyamatos megújulása Biofilm képzés, receptorok lekötése, tápanyag kompetíció, bakteriosztatikus termékek ⇒ kórokozó baktériumok kolonizációjának gátlása Állandó antigén stimuláció ⇒ immunrendszer extrauterin fejlıdése és megfelelı mőködése
2008. november 20.
28
14
A vastagbél normál flórájának szerepe kóros folyamatokban
Extraintestinális fertızések Transzlokáció
Immunszupprimált állapotok Obstrukciók Shock Következmény Endotoxaemia Bacteriaemia Sepsis
2008. november 20.
29
Bakteriális transzlokáció kísérletes intestinális obstrukció után patkányban A: epithel sejtek elemelkedé elemelkedése és a lamina propria bakteriá bakteriális invá invázió ziója B: submucosalis nyiroké nyirokérben coccusok és pá pálcá lcák
2008. november 20.
30
A
B
15
A normál baktérium flóra egyensúlyának felborulása
Okok
Következmények
Táplálkozás Széles spektrumú per os antibiotikum terápia Emésztési és felszívódási zavarok, vitaminhiányos állapotok Bél perisztaltika zavarai, túlzott gázképzıdés
Antibiotikum kezeléssel összefüggı kórképek
Enyhe: „egyszerő” hasmenés Súlyos: pseudomembranosus colitis (Clostridium difficile)
2008. november 20.
31
Pseudomebranosus colitis
A colon transversum falá falának megvastagodá megvastagodása
C. difficile és neutrophilek
2008. november 20.
Jellegzetes sá sárgá rgás plakkok
32
16
Az Enterobacteriaceae család tagjai által okozott extraintestinális fertızések
2008. november 20.
33
Extraintestinális kórképek Általában gennyes fertızések Nosocomiális átvitel gyakori Húgyúti fertızések (UTI) Intra-abdominalis fertızések
Cholecystitis, cholangitis Hasüregi tályogok Lokális és diffúz peritonitis
Sebfertızések Szemfertızések Légzı rendszer fertızései Sepsis Meningitis
2008. november 20.
34
17
Ascendáló húgyúti fertızések
2008. november 20.
35
Húgyúti fertızések (UTI)
E. coli (80%)
Prediszpozíció Aszcendáló (ritkán hematogén) Cystitis, pyelonephritis Virulenciafaktorok (UPEC-törzsek)
Haemaggl. adhéziós fimbriák
Mannóz rezisztens (MR) fibriák (Fantigén), P-fimbriák (vércsoport P anyag) ⇒ pyelonephritis Mannóz szenzitív (MS) fimbriák ⇒ cystitis
E. coli fimbriákkal
Haemolysin
2008. november 20.
36
18
Húgyúti fertızések (UTI)
P. mirabilis
Prediszpozíció Aszcendáló fertızés Nosocomialis (katéter, mőtét) Virulencia faktorok Flagellák: erıs motilitás Adhéziós fimbriák Ureáz (pH↑, irritáció, kıképzıdés) P. mirabilis rajzása
2008. november 20.
37
Újszülöttkori meningitis és sepsis
E. coli K1 (80–85%) K1-antigén
Meningococcus B-ag-nel identikus Tolerancia ⇒ nincs antitest képzés Transzlokáció
2008. november 20.
38
19
Pneumonia
Nosocomialis Predispozíció Kórokozók E. coli, K. pneumoniae, K. oxytoca, Enterobacter spp. Bronchopneumonia
Lobaris pneumonia (Friedländer) K. pneumoniae
2008. november 20.
39
Intra-abdominalis fertızések
Szabad hasüregi levegı a rekesz alatt: perforáció
2008. november 20.
Diffúz peritonitis vastagbél perforáció után
40
20
Gram-negatív fakultatív anaerob pálcák
2008. november 20.
41
Gram-negatív fakultatív anaerob pálcák (Pozitív glükóz fermentáció)
Oxidáz pozitív
Oxidáz negatív
Aeromonadaceae
Vibrionaceae
Enterobacteriaceae
Fakultatív patogén
Vibrio
2008. november 20.
Plesiomonas
Aeromonas
Escherichia Klebsiella Enterobacter Proteus Serratia Providencia Morganella Edwardsiella Citrobacter Hafnia
Obligát patogén
Salmonella Shigella Yersinia
42
21
Vibrionaceae család Species
Betegség
V. cholerae O1 klasszikus és El Tor
Kolera
V. cholerae O139
Kolera
V. parahaemolyticus
Gastroenteritis
V. vulnificus
Sebfertızés, sepsis
Nem agglutináló (NAG) vibriók
Ritkán gastroenteritis
2008. november 20.
43
V. cholerae osztályozása NEM-TOXIKUS Lehet, hogy nem O1, vagy O139 vagyok! (de én is tudok
TOXIKUS Én vagyok a vibrio! O1 vagy O139 törzs
problémát okozni)
2008. november 20.
44
www.forth.go.jp/tourist/ panf/cholerae.html
22
Osztályozás Toxigenic V. cholerae Felosztás 2 epidemiológiai szerotípusba
O1
O139
Felosztás 2 biotípusba
Klasszikus
El Tor
Mindegyik O1 biotípusnak lehet 3 szerotípusa
inaba
ogawa
hikojima
Ribotípusokba osztás
A&C
A&B (A kicsi C) Antigének
A, B, C
Designed 2008. november 20.using information presented in review by NS Crowcroft. 1994. Cholera: Current Epidemiology. The Communicable Disease Report. 4(13): R158-R163.
45
Kolera vibriók legfontosabb jellemzıi
R. Koch, 1883 Gr–, hajlított pálcák Fakultatív anaerobok Glükóz OF ‡ Motilitás + Kataláz + Oxidáz + Nitrát redukció + Antigének
O1 és O139 Fimbriák: A, B, C
2008. november 20.
46
23
A kolera vibriók virulencia faktorai Virulencia faktor
Biológiai hatás
Cholera toxin
Folyadék és elektrolit hiperszekréció
Fimbriák
Adhézió a nyálkahártyához
Járulékos kolonizációs faktor
Adhézió a nyálkahártyához
Haemagglutináló proteáz (mucináz)
Enterális gyulladás „tight junction” degradáció
Sziderofór
Vas szekvesztrációja
Neuraminidáz
Toxin receptor up-reguláció
2008. november 20.
47
Kolera: patomechanizmus, pathogenezis
Fertızı forrás: ember, vízi állatok Átvitel módja: enteralis ⇒ ivóvíz, tenger gyümölcsei Behatolási kapu: szájon át Célszerv: vékonybél Adhézió: fimbriák, járulékos kolonizációs faktor Invázió: nincs Szervezet károsítása: toxin Fertızés kimenetele Kórokozó ürítés: beteg, tünetmentes hordozó ⇒ széklettel üríti Immunitás: lokális IgA (vérben IgG)
2008. november 20.
48
24
Pathogenézis
Az emelkedett cAMP okoz:
Mucosalis sejtek pumpálnak nagy mennyiségő Clbélrendszerbe Víz, Na+, és más elektrolitok is vándorolnak az ozmotikus és az ion gradiensnek megfelelıen Hasmenést eredményez, amely a kolera klasszikus tünetéhez vezet.
2008. november 20.
49
CT TOXIN CT egy A-B típusú toxin V. cholerae toxicitása
1.
2.
3.
CT felelıs a hatásért. A kórokozó soha sem tör be a sejtbe. Az A alegység cAMP szint emelkedést okoz. A magas ic cAMP eredményezi a klorid ion, bikarbonát és víz szekréciót.
Lencer, Wayne. 2001. Microbes and Microbial Toxins: Paradigms for Microbial-Mucosal Interactions. V. cholerae: invasion of the intestinal epithelial 2008. november 20. barrier by a stably folded protein toxin. Am J Physiol. Gastrointest Liver Physiol. 280: G781-G786. 50
25
Terjedés lehetıségei
Víz (fertızı dózis = 109) Élelem (fertızı dózis = 103) Emberrıl emberre
2008. november 20. The 19th-century illustration depicting the spirit of death at a pump was taken from
http://news.nationalgeographic.com/news/2004/06/0614_040614_tvcholera.html
51
Klinikai manifesztáció
2008. november 20.
www.who.int/entity/water_sanitation_health/dwq/en/admicrob6.pdf
52
26
A kolera pándémiák története
İshazája: India, Ganges deltája Interkontinentális utazások ⇒ 1817-tıl hét pándémia Jelenleg: hetedik pándémia, V. EL Tor
1961: Ázsia 70–80-as évek: Afrika, Európa, Óceánia 1991: Dél-Amerika
1992 : V. cholerae O139 „Bengál”
Gyors terjedés (Ázsia, Európa, USA) Nincs keresztimmunitás az O1-es törzsekkel Nyolcadik pándémia?
2008. november 20.
53
A hetedik kolera pándémia
2008. november 20.
54
27
Kolera esetek, WHO: 2000–2001
2008. november 20.
55
A kolera kórképe
Rizslé szerő hasmenés (25 l/nap) Dehydratio Haemoconcentratio Vér pH Se K+, Na+ Se Glu ↑ Shock Letalitás
Kezeletlen Klasszikus: 60% El Tor: 15–30% Kezelt: 1%
Kolerás csecsemı rehidrálás elıtt és után
Rizslé szerő hasmenés 2008. november 20.
56
28
Kolera ágyak
2008. november 20.
57
Kolera járványok
Kolera tábor Mozambikban
2008. november 20.
Kolera kórház Mozambikban
58
29
Laboratóriumi diagnózis Anamnézis alapján! Széklet mikroszkópia: sötétlátóteres vizsgálat Transzport Tenyésztés Azonosítás
Sötétlátóteres vizsgálat
Biokémia Szerotipizálás (O1, O139)
Lúgos peptonvíz
Antibiotikum érzékenység
Agglutináció O1 és O139 Biokémiai azonosítás
TCBS tenyészet
2008. november 20.
59
Mikrobiológiai és molekuláris detektáló módszerek
Mikrobiológiai tenyésztés alapú módszerek, széklet és víz minta felhasználása Gyors tesz Sötét látóteres mikroszkóp Rapid immunoassays Molekuláris módszer PCR & DNA próbák
2008. november 20.
www.city.niigata.niigata.jp/ info/sikenjo/521s... 60
30
Kolera kezelése
2008. november 20.
61
Sack, David, et al. 2004. Seminar: Cholera. The Lancet. 363: 223-233.
A kolera kezelése
Folyadék és elektrolit pótlás
Intravénásan Orális rehidráló folyadék ORF Glükóz 20g/l NaHCO3: 2,5 g/l NaCl: 3,5 g/l KCl: 1,5 g/l
Folyadékterápia, Peru
Antibiotikum kezelés
Ciprofloxacin Doxycyclin
2008. november 20.
Folyadékterápia, Bangladesh
62
31
A kolera megelızése
WHO-nak is bejelentendı Karantén Szanitáció Higiénés szabályok betartása Oktatás Védıoltás
Vakcinák Elölt baktérium parenterálisan Elölt baktérium + B-alegység toxoid per os Génmanipulált gyengített per os 3–6 hónapig 50–60% védettség Endémiás területre utazóknak WHO: hamis biztonságérzet (!)
2008. november 20.
63
Kezelés: Oral Rehidració •
• •
•
Halálozási rátát csökketeni lehet 50%-ról kevesebb mint 1% -ra. Gyógyulás 3-6 napon belül Széklettel elveszített folyadék mennyiség legalább 1.5x-t kell a betegnek adagolni Akkor kell használni ha a dehidráció során a testtömeg kevesebb mint 10%-át elvesztette.
2008. november 20.
64
32
Kezelés: Oral Rehidrációs Só (ORS) •
Oral Rehidrációs Só csomagok • • •
WHO, UNICEF osztja 1 L vízben lehet feloldani NaCl, KCl, NaHCO3, glükoz
2008. november 20.
65
Kezelés: Hogy mőködik az ORS? •
•
•
A Na+ transzport a glükoz transzporthoz kapcsolt a vékonybélben A glükoz elısegíti a hatékonyabb folyadék és só felszívódást A kálium passzívan szívódik fel 2008. november 20.
66
33
2008. november 20.
479. Dehidrált beteg kezelés elıtt
2008. november 20. 480. Rehidráció– dehidrált beteg kezelés után
67
68
34
Kezelés: Antibiotikumok • • •
Kiegészíti az oralis rehidrációt Felére csökkenti a folyadékvesztést Felére csökkenti a gyógyulási idıt •
• •
2-3 nap, 4-6 helyett
Tetracyclin, Doxycyclin Nem szükséges • • •
Betegség rövid idıtartama Antibiotikum rezisztencia Használatának kevés haszna
2008. november 20.
69
Utazók elıvigyázatossága • • • • •
A vizet fızni kell vagy klórozni/jódozni Jégkockát kerülni Mindent meg kell fızni Jó tanács: “Boil it, cook it, peel it, or forget it.” Gyakori kézmosás
2008. november 20.
70
35
Kolera megelızése: higiénés szabályok
2008. november 20.
71
A. hydrophila
P. shigelloides
Természetes vizek
A. hydrophila fertızés halban
Cellulitis
2008. november 20.
Myonecrosis
„Sea food”
Gastroenteritis
72
36
Spirális és hajlított Gram-negatív, baktériumok
2008. november 20.
73
Spirális és hajlított Gram-negatív baktériumok
Spirillaceae
Campylobacter
C. jejuni 2008. november 20.
Helicobacter
H. pylori
Spirillum
S. minus 74
37
Campylobacter genus legfontosabb speciesei Species C. jejuni
Rezevoár
Betegség
Gastroenteritis, Szárnyas, sertés, sepsis, meningitis, szarvasmarha, nyúl Guillan-Barré
Gyakoriság Gyakori
C. coli
Sertés, szárnyas, szarvasmarha, juh
Sepsis, gastroenteritis, meningitis
Mérsékelten gyakori
C. fetus
Szarvasmarha, juh
Sepsis, gastroenteritis, meningitis
Mérsékelten gyakori
C. lari
Szárnyas, kutya, macska, majom, ló
Gastroenteritis, sepsis
Ritka
Kutya, macska
Gastroenteritis, sepsis, tályogok
?
C. upsalensis 2008. november 20.
75
A campylobacterek jellemzése
Gr–, hajlított pálca, apró (0,3–0,6 µm) Végállású flagellum Mikroaerofil
5–7% O2 5–10% CO2
C. jejuni, SEM
Termofil: 42ºC Nem fermentáló Kataláz +, oxidáz + Nitrát redukció + Antigén szerkezet
O, H, K
2008. november 20.
76
C. jejuni, SEM
38
A campylobacterek virulencia faktorai
Flagellum ⇒ motilitás Adheziós faktorok (?) Inváziós faktorok (?) C. fetus: S-protein ⇒ C3b kötıdésének gátlása ⇒ antifagociter hatás Guillan-Barré
LPS-core és a myelin hüvely GM1-gangliosidjának hasonlósága ⇒ autoimmun folyamat anti-GM1 antitestek demyelinisatio
2008. november 20.
77
C. coli és a Guillan-Barré szindróma
2008. november 20.
78
39
A campylobacteriosis epidemiológiája
Zoonosis: kontaminált élelmiszerek és ivóvíz Nem kellıen hıkezelt húsfélék Emberrıl-emberre: faecaloralis úton (gyermekközösségek) Alacsony infekciós dózis (500 cfu) Rendkívül gyakori (fejlıdı országokban a hasmenések 80%-a)
2008. november 20.
79
Campylobacteriosis kórképe
Lappangási idı: 1–2 nap Véres-nyákos hasmenés Láz Hasi fájdalom, görcsök Spontán gyógyulás: 1–7 nap alatt Szövıdmény
Elhúzódó betegség Szisztémás fertızés Reaktív arthritis Guillan-Barré szindróma
2008. november 20.
80
40
Campylobacteriosis diagnosztikája
Minta
Széklet Hemokultúra, liquor Élelmiszer
Tenyésztés Azonosítás Antibiotikum érzékenység vizsgálata
Mikroaerofil tenyésztés
2008. november 20.
Campylo-agar tenyészet
Biokémiai azonosítás
81
A campylobacteriosis kezelése és megelızése
Tüneti (szupportív) kezelés Antibiotikum
Gastroenteritisben
Szisztémás fertızésben
Erythromycin, doxycyclin, ciprofloxacin, amoxicillin/clavulánsav Carbapenem, aminoglycosid, chloramphenicol
Megelızés: élelmiszer higiéné
2008. november 20.
82
41
Helicobacter pylori jellemzése
Gr–, spirális pálca Mikroaerofil Nem fermentáló Végálló flagellák: motilitás Kataláz +, oxidáz + Ureáz + H. pylori
2008. november 20.
83
NOBEL EXPERIENCE J.R. Warren and B.J. Marshall (Nobel Prize for Medicine and Physiology, 2005) 2008. november 20.
84
42
H. pylori virulencia faktorai
Adhezinek Flagellák Mucináz, foszfolipáz Ureáz aktivitás HspB ⇒ ureáz ↑ „Acid inhibitory protein” Szuperoxid dizmutáz, kataláz Vakuolizáló citotoxin Egyéb (?)
2008. november 20.
Ureáz pozitivitás
Citotoxicus hatás HeLa sejteken 85
Patogenezis : - H. pylori motil, több flagella található az egyik végén, ezek segitségével jut át a nyákrétegen a nyálkahártya felszinéhez, ahol a pH már fiziológás. UREÁZ-enzimet termel, így a keletkezı ammónia kivédi a gyomorban lévı savas hatást A baktérium eljut az epitheliális sejt felszinéhez Toxins & LPS ⇒ ammonia termelés, a mucosa sejtek károsítása. PROTEÁZ-t termeIt, amely megváltoztatja a mucosat 2) - Bejutás után → gastritis & hypochlorhydria 2008. november 20.
86
43
A mechanizmus még mindig nem teljesen tisztázott! Szövettanilag: krónikus & akut gyulladás, PMN & mononukleáris sejtek inváziója ⇒ dyspepsia, peptikus fekély, gyomor daganat 2008. november 20.
87
H. pylori fertızés epidemiológiája
Világszerte gyakori Nincs szezonalitása Alacsony szocio-ökonómiás közösségekben incidencia ↑ Rezervoár: ember Átvitel
Faeco-oralis Oro-oralis
Családi halmozódás
2008. november 20.
88
44
H. pylori és fekélybetegség
Krónikus gastritis H. pylori gyomor mucosa, SEM
2008. november 20.
Duodenalis fekély
H. pylori hisztológia
89
H. pylori és gyomorrák
Antralis adenocarcinoma gastroscopos képe 2008. november 20.
Gyomor adenocarcinoma: máj metastasis és ascites
90
45
Laboratóriumi diagnózis I. 1) Klinikai minta: gasztroszkopiás biopszia, szérum szerológiára. Direkt kenet: gasztroszkopiás biopsziában Giemsa-val festve, vagy ezüst impregnációval felismerhetıek a jellegzetes hajlott baktériumok.
H. pylori histology, silver impregnation
2008. november 20.
91
Biopsziás anyagból
Laboratóriumi diagnozis II Direkt kenet: gasztroszkopiás biopsziában Giemsa-val festve, vagy ezüst impregnációval felismerhetıek a jellegzetes hajlott baktériumok. tenyésztés: - szelektív táptalajon Skirrow’s Microaerophil körülmények (5 % O2, 10 % CO2) optimális pH 6,0 – 7,0 3-6 nap → telepek szintelenek, vagy szürkék, kerekek, konvexek. Biokémiai reakciók: ureáz + (!) / kataláz +, oxidase + /
2008. november 20.
H. pylori tenyészet
Biokémiai identifikálás
92
46
Vérszérumból
H. pylori ELISA (IgG, IgA)
Szerológia: a gyors tesztek az IgG antitestet mutatják ki a beteg szérumában. A pozitív eredmény nem diagnosztikus akut fertızésben, a terápia után is pozitív.
H. pylori Western blot
A teszt negatív eredménye kizárja a H. pylori fertızést.
2008. november 20.
93
Speciális tesztek: - gasztroszkopiás biopszia anyag ureáz termelésének vizsgálata ureumot tartalmazó táptalajba helyezésével. Színreakció jelzi a pozitivítást. ⇒ ha H. pylori van jelen az ureáz enzim gyorsan hasítja az ureumot és a pH változása színváltozást okoz
Ureáz pozitivitás
- 14C-urea belégzési teszt jelzett urea beadása után ⇒ ha H. pylori van jelen jelzett CO2 detektálhtó a beteg leheletében. 2008. november 20.
94
47
Radióaktív urea kilégzési teszt
2008. november 20.
95
H. pylori eradikáció
Kombinált, kéthetes kezelés
Protonpumpa gátlók Antibiotikumok
Clarithromycin + metronidazol Amoxicillin + metronidazol Doxycyclin + metronidazol
Bizmut sók
2008. november 20.
96
48
