BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1.
Kesimpulan Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat diambil
kesimpulan bahwa golongan metabolit sekunder dari daun pacar kuku yang memiliki aktivitas antioksidan
adalah senyawa flavonoid. Selain itu
golongan senyawa metabolit sekunder dari hasil fraksinasi ekstrak etanol memiliki aktivitas antioksidan yang lebih baik dibandingkan dengan ekstrak etanol daun pacar kuku (Lawsonia inermis Linn.) yang ditinjau dari harga IC50 fraksi etanol daun pacar kuku (IC50 = 0,1671 mg/ml) mempunyai sifat antiradikal bebas lebih besar dari pada ekstrak etanolnya (IC50
=
0,2421
mg/ml).
5.2.
Saran Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, maka perlu dilakukan :
1.
Isolasi lebih lanjut untuk mendapatkan senyawa murni dari ekstrak etanol daun pacar kuku yang memiliki aktivitas antioksidan.
2.
Analisis struktur lebih lanjut terhadap senyawa hasil fraksinasi menggunakan spektroskopi RMI- proton dan spektroskopi massa.
3.
Perlu dilakukan penelitian selanjutnya dengan menggunakan metode pemisahan senyawa antioksidan selain dengan menggunakan kolom kromatografi, misal dengan metode HPLC-preparatif.
4.
Perlu dilakukan penelitian selanjutnya dengan menggunakan metode penentuan daya antioksidan dari ektrak dan fraksi-fraksi terpilih selain dengan menggunakan metode DPPH. Hal ini terutama ditujukan bagi senyawa antioksidan lipofilik, dimana penggunaan metode DPPH kurang begitu sesuai. 91
DAFTAR PUSTAKA Adalina, Y., Luciasih, A., Andi, R., 2010, Sumber Bahan Pewarna Alami Sebagai Tinta Sidik Jari Pemilu, Badan Penelitian dan pengembangan Kehutanan Departemen Kehutanan, Bogor, hal 7-9. Amin, 1996, Penyakit Paru Obstruktif Menahun – Polusi Udara, Rokok & α -1 – antitripsin, cetakan ke 1, Airlangga University Press, Surabaya, hal 23-28. Anonim, 1985, Cara Pembuatan Simplisia, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal 5-6. Anonim, 1989, Materia Medika Indonesia, Jilid V, Departemen Kesehatan Republik Indonesia Jakarta, hal 342. Anonim, 1995, Materia Medika Indonesia, Jilid VI, Departemen Kesehatan Republik Indonesia Jakarta, hal 352-353. Anonim, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Dirjen POM, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal 1017. Aqil, F., Ahmad, I., and Mehmood, Z., 2006, Antioxidant and Free Radical Scavenging Properties of Twelve Traditionally Used Indian Medicinal Plants,Turk J Biol, 30, pp. 177-183. Cavin, A., Hostettmann, K., Djatmiko, W., Botterat, O., 1998, Antioxidant and Lipophylic Constituents of Tinospora crispa, Planta Medica, 64, pp. 393-396. Chatten, L. G., 1996, Pharmaceutical Chemistry Theory and Application, edited Colum, Thin Layer Chromatography, vol. I. Marcel Dekker, pp. 368-380.
92
93 Chaudhary, D., Sandeep, G., Priyanka, P., 2010, Lawsonia inermis linnaeus : A Phytopharmacological Review, International Journal of Pharmaceutical Sciences and Drug research, 2 (2), pp. 91-98. Corwin, E. J., 2008, Buku Saku Patofisiologi, ed. 3, Penerbit EGC, Jakarta, hal. 32-33. Crinner, E., K. Hagymasi, A. Blazovics, A. Kery, E. Szoke, E. Lemberkovics, 2000, Invitro antioxidant properties of Helichrysum arenarium L, Journal of Etnopharmacology, 73, 437-443. Dianitami, R., 2009, Efek Rumput Laut Eucheuma sp. terhadap Kadar Glukosa Darah dan Jumlah Trombosit Wistar yang Diinduksi Aloksan, Skripsi Sarjana fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, hal. 1. Donatus, I. A., 2001, Toksikologi Dasar, Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi, UGM Press, Yogyakarta. Droge, W., 2002, Free radicals in the physiological control of cell function, Physiology Review, 82, pp. 47-95. Elya, B., Farida, I., Siti, K., 2007, Penggunaan Daun Pacar Kuku (Lawsonia inermis Linn.) Sebagai Obat Luka Alternatif, Jurnal Bahan Alam Indonesia, 6 (3), hal. 85-88. Gheldof, N., Hong, W. X., Engeseth, N. J., 2002, Identification and quantification of antioxidant components of honeys from various floral sources, Journal of Agricultural and Food Chemistry 50:5870-5877. Gritter, R. J., Bobbit, J. M., Schwarting, A. E., 1991, Pengantar Kromatografi. Ed. 2 (Padmawinata, K., Penerjemah), Penerbit ITB, Bandung, hal. 107. Halliwell, B., 2002, Food-Derived Antioxidants : How to Evaluate Their Importance in Food and In Vitro. In : Cadenas, E. & Lester P, Handbook of Antioxidants Second Edition Revised And Expanded, Marcel Deker. Inc., New York, pp. 1-33, 309.
94 Harborne, J. B., 1996, Metode Fitokimia : Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan, terbitan kedua, Penerbit ITB, Bandung, hal. 834, hal. 102-108. Inoue, M., 2001, Protective mechanisms against reactive oxygen species, In: Arias IM The liver biology and pathobiology Lippincott Williams and Wilkins 4th-ed, Philadelphia, pp. 281-90. Khodaparast, H. and Dezashibi, Z., 2007, Phenolic Compound and Antioxidant Activity of Henna Leaves extracts (Lawsonia inermis), World Journal of Dairy & Food Sciences 2 (1), pp. 38-41. Khopkar, S. M., 1990, Konsep Dasar Kimia Analitik (terjemahan). Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, hal. 238. Kim, D. K., Lee, K. W., Lee, H. J., Lee, C. Y., 2002, Vitamin C Equivalent Antioxidant Capacity of Phenolic Phytochemicals, Journal of Agricultural and Food Chemistry (50), pp. 3713-3717. Kikuzaki, H., Hisamoto, M., Hirose, K., Akiyama, K., and Taniguchi, H., 2002, Antioxidants Properties of Ferulic Acid and Its Related Compound, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50:2161-2168. Kristanti, A. N., Nanik, S. A., Mulyadi, T., Bambang, K., 2008, Buku Ajar Fitokimia, Airlangga University Press, Surabaya, hal. 53-54. Krinsky, N. I., 1988, Mechanism of action of biological antioxidans. Society for Experimental Biology and Medicine, Boston. Larson, R. A., 1997, Naturally Occuring Antioxidants, Lewis Publisher, Boca Raton, New York, pp. 25-28. Markham, K. R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid, (Padmiwinata, K., penerjemah), Penerbit ITB, Bandung, hal. 5-15, hal. 76. Marliana, S. D., Suryanti, V., dan Suyono, 2005, Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam
95 (Sechium edule Jacq. Swartz) dalam Ekstrak Etanol. Biofarmasi 3 (1), hal. 26-31. Mega, I M., Swastini, D. A., 2010, Skrining fitokimia dan aktivitas antiradikal bebas ekstrak metanol daun gaharu (Gyrinops versteegii), Jurnal Kimia 4(2): 187-192. Moller, J. P., Juul, B. and le Maire, M, 1996, Structural Organization, Ion Transport and Energy Transduction of P-type ATPases, Biochemistry Biphysical Acta, 1286, pp. 1-51. Mulja, M., dan Suharman, 1995, Analisis Instrumental, Airlangga University Press., Surabaya, hal. 26-60. Navarro, M. C., Montilla, M. P., Martin, A., Jimenez, J., and Utrina, M. P., 1993, Free Radical Scavenging and Antihepatotoxic Activity of Rosmarius tomentosus, Planta Medica, 63 (7), pp. 393-396. Olinescu, R. and Smith, T. L., 2002, Radical in Medicine, Nova Science Publishers, New York, pp. 1-3. Pokorni, J., Yanishlieva, N., Gordon, M., 2001, Antioxidant in Food ; Practical Applications, New York, CRC Press. Pratt, D. E., 1992, Natural Antioxidants From Plant Material, Di dalam : M.T. Huang, C.T. Ho, dan C.Y. Lee, editor, Phenolic Compounds in Food and Their Effects on Health, Washington DC: American Society. Pratt, D. E., dan B. J. F. Hudson, 1990, Natural Antioxidants not Exploited Comercially, Di dalam : B. J. F. Hudson, editor. Food Antioxidants, London: Elsevier Applied Science.\ Prakash, A., 2001, Antioxidant Activity., Medallion Laboratories : Analithycal Progres , Vol 19 No : 2. pp. 1 – 4. Proctor, P. H., Reynolds E. S., Free radicals and disease in man. Physiologyic Chemistry & Physical Medicine, 16;1984: pp. 175-95.
96 Rahmat, A., Susi, E., Patimah, I., Taufiq, Y. Y. H., and Moh, F., 2006, Chemical Constituents, Antioxidant Activity and Cytotoxic Effects of Essential Oil from Strobilanthes crispus and Lawsonia inermis, Journal Biological Sciences, 6 (6), pp. 1005-1010. Robards, K., Antolovich, M., Prenzler, P. D., Patsalides, E., Mcdonald, S., 2001. Methods for Testing Antioxidant Activity. The Royal Society of Chemistry. 183-198. Rohman, A., 2009, Kromatografi Untuk Analisis Obat, Ed. 1, Penerbit Graha Ilmu, Yogyakarta, hal. 45-52. Santosa, M. H., 1998, Pengujian Antiradikal Bebas DPPH Ekstrak Gratophyllum pictum L. Griff secara spektrofotometri. Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia, ITB, Bandung, 12, hal 26-27. Sarker, S. D., Latif, Z and Gray, A. I., 2006, Natural Products Isolation, Ed. 2, Humana Press, Totowa, New Yersey, pp. 515. Sastrohamidjojo, H., 1992, Spektroskopi Yogyakarta, hal. 1-16, hal. 123-140.
Inframerah,
Liberty,
Sharma, R. K, and Agarwal, A, 1996, Role of Reactive Oxygen Species in Male Infertility, Urology, 48, pp. 835-850. Singh, B., Anand, K. K., Chand, D., and Chandan, B. K., 1992, An Evaluation of Lawsonia alba Extract as Hepatoprotective Agent, Planta Medica, 58 (1), pp. 5-22. Srivastava, V. K., and Srivastava, K. K., 1976, Introduction to Chromatography Teory and Practice. S. Chand and Company Ltd, New Delhi, pp. 46-63. Stahl, E., 1969, Thin Layer Chromatography, second edition, New york, Springer verlag, pp. 61-67. Stanley, P., 1998, Kimia Organik, Jilid 4, Penerbit ITB, Bandung, hal. 955.
97
Subarnas, A., 2001, Komponen Aktif Antioksidan dalam Bahan Alam. Prosiding Seminar & Lokakarya Nasional. Pusat Penelitian Kesehatan Lembaga Penelitian Universitas Padjajaran, Bandung, 29-30 September, hal. 1-8. Suryohudoyo, P., 2000. Kapita Selekta Ilmu Kedokteran Molekuler, CV. Sagung Seto, Jakarta, hal 31-47. Swartz, H, M., 1979, Free Radical in Cancer, in : Submolecular Biology in Cancer, Ciba Foundation, Netherlands. Underwood, J. C. E., 1999, Patologi Umum dan Sistematik Ed. 2, (Editor : Prof. Dr. Sarjadi, dr., SpPA, Penerbit EGC, Jakarta, hal. 119. Van Acker, S. A., van Den Berg, D. J., Tromp, M. N., Griffioen, D. H., 1996, Structural Aspects of Antioxidant Activity of Flavonoid, Free Radical Biology Medicine, 20 (3), pp. 331-342. Vani, T., Rajani, M., and Shishoo, C. J., 1997, Antioxidants Properties of The Ayurvedic Formulation Triphala and It’s Constituens, International Journal of Pharmacognosy, 35 (5), pp. 313-316. Voigt, R., 1995, Buku pelajaran Teknologi Farmasi, Edisi 5 (Soewandhi, Dr. Res. Nat. S. N., Apt, Penerjemah), Penerbit Gajah Mada Universitas Press, hal. 558-559. Wanasundara, P. K. J. P. D., F. Shahidi, 2005, Baileys”s Industrial Oil and Fat Products, Sixth Edition, Six Volume Set, Edited by Fereidoon Shahidi, John Wiley & Sons, Inc. pp. 436. Youngson, R., 2005, Antioksidan : Manfaat Vitamin C dan E bagi Kesehatan, terjemahan : Susi Purwoko, Jakarta, Arcan, hal. 78-80 Zubardiah. L., Dewi, N. M., Ibrahim, A., 2008, Khasiat daun Lawsonia inermis L. sebagai Obat Tradisional Antibakteri, Surabaya, hal 1-10.
LAMPIRAN A Skrining Fitokimia pada simplisia, ekstrak dan fraksi ( Marliana et al., 2005) Kandungan Kimia Alkaloid
Tanin & polifenol
Saponin
Flavonoid
Metode pengujian
Hasil positif
3 ml sampel diletakkan dalam cawan porselin + 5 ml HCl 2 M diaduk dan didinginkan. + 0,5 g NaCl diaduk dan disaring filtrat + HCl 2 M 3 tetes + pereaksi Dragendorff 3 ml sampel + aquadest panas ekstraksi lalu didinginkan saring Filtrat A dan B. Filtrat A + 3 tetes FeCl3 Filtrat B + gelatin 3 ml sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi + 10 ml akuades dikocok selama 30 detik 3 ml sampel diekstraksi dengan aquadest panas. Setelah itu ditambahkan 5 tetes NaCl 10% dan disaring. Kemudian tambahkan pereaksi FeCl3. Amati perubahan warna yang terjadi.
+ pereaksi Dragendorff (Endapan coklat muda atau kuning). Kertas saring ditetesi dragendorff + sampel kertas saring berwarna orange atau merah.
98
Filtrat A + 3 tetes FeCl3 biru hijau Filtrat B + gelatin biru hitam
Terbentuk busa yang stabil (tidak hilang selama 30 detik)
Biru kehitaman
99 LAMPIRAN B Langkah Kerja Alat Multiskan GO (Thermoscientific, Finland)
1.
Nyalakan alat Multiskan Go dengan menekan tombol START atau ON. Tunggu sampai alat siap digunakan.
2.
Masukkan 96-wellplate pada bagian depan alat untuk pembacaan.
3.
Apabila ingin mengukur bagian tertentu dari plat maka dapat dilakukan dengan memilih titik awal dengan tekan tombol panah dan tekan tombol OK. Gerakan kursor sampai bagian yang diinginkan kemudian tekan F1 untuk menerima pemilihan daerah yang akan diukur.
4.
Apabila seluruh bagian plat diukur maka dapat dilakukan dengan menekan ALL atau dengan tekan F3 (pilih semua atau Clear). Pilih semua apabila ingin mengukur semua plat atau pilih clear untuk membersihkan plat.
5.
Pilih dan tentukan parameter yang akan digunakan dalam pengukuran.
6.
Tekan START atau ON untuk pembacaan hasil pengukuran.
100 LAMPIRAN C Sertifikat Determinasi Tanaman Pacar Kuku
101 LAMPIRAN D Perhitungan Rendemen Ekstrak Perhitungan perolehan ekstrak etanol total dan rendemen ekstrak sebagai berikut : a.
Simplisia Basah
: 3 kg
b.
Simplisia Kering
: 1 kg/10,1 L
c.
Berat cawan 1 (Ekstrak)
: 291,11 gr
Berat cawan 1 (Kosong)
: 162,66 gr 128,45 gr
d.
Berat cawan 2 (Ekstrak)
: 154,7224 gr
Berat cawan 2 (Kosong)
: 82,6065 gr 72,1159 gr
e.
Berat cawan 3 (Ekstrak)
: 103,86 gr
Berat cawan 3 (Kosong)
: 73,52 gr 30,34 gr
Total ekstrak etanol
: 128,45 gr + 72,1159 gr + 30,34 gr =230,91 gr
Rendemen ekstrak
: 23,09 %
102 LAMPIRAN E Cara Perhitungan Kadar Abu Simplisia
Replikasi 1: W krus kosong
= 21,0046 g
W krus + abu
21,0042 g
21,1523 g
X= 21,0044 g W simplisia % Kadar abu
= 21,1526 g
X = 21,1523 g
= 2,4995 g = (berat krus + abu) – berat krus kosong X 100% berat simplisia = 21,1523 g – 21,0044 g X 100% 2,4995 g = 5,9172 %
Replikasi 2: W krus kosong
= 20,8501 g
W krus + abu
20,8504 g X= 20,8502 g W simplisia % Kadar abu
= 21,0043 g 21,0038 g 21,0037 g
X = 21,0039 g = 2,4713 g = (berat krus + abu) – berat krus kosong X 100% berat simplisia = 21,0039 g – 20,8502 g X 100% 2,4713 g = 6,2193 %
103 Replikasi 3: W krus kosong
W simplisia % Kadar abu
= 21,2323 g
W krus + abu
= 21,3932 g
21,2326 g
21,3926 g
X= 21,2324 g
21,3926 g
X = 21,393 g = 2,5059 g = (berat krus + abu) – berat krus kosong X 100% berat simplisia = 21,393 g – 21,2324 g X 100% 2,5059 g = 6,4088 %
104 LAMPIRAN F Cara Perhitungan Kadar Abu Ekstrak
Replikasi 1: W krus kosong
W simplisia % Kadar abu
= 21,0135 g
W krus + abu
= 21,0678 g
21,0136 g
21,0676 g
X= 21,0135 g
21,0683 g
X = 21,0679 g = 2,5298 g = (berat krus + abu) – berat krus kosong X 100% berat simplisia = 21,0679 g – 21,0135 g X 100% 2,5298 g = 2,1504 %
Replikasi 2: W krus kosong
= 20,8522 g
W krus + abu
20,8519 g
20,9236 g
X= 20,8521 g W simplisia % Kadar abu
= 20,9226 g
20,9236 g
X = 20,9233 g = 2,5147 g = (berat krus + abu) – berat krus kosong X 100% berat simplisia = 20,9233 – 20,8521 g 2,5147 g = 2,1504 %
X 100%
105 Replikasi 3: W krus kosong
W simplisia % Kadar abu
= 21,2345 g
W krus + abu
= 21,2933 g
21,2345 g
21,2940 g
X= 21,2345 g
21,2941 g
X = 21,2938 g = 2,5187 g = (berat krus + abu) – berat krus kosong X 100% berat simplisia = 21,2938 g – 21,2345 g X 100% 2,5187 g = 2,3544 %
106 LAMPIRAN G Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan (%) berbagai Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Pacar pada menit ke-0 Konsentrasi (mg/ml) 1 0,5 0,25 0,125 0,0625 0,03125 0,015625 0,0078125 0,0039063 0,0019531 0,0009766 0,0004883
Absorbansi (0’) 1 0,315 0,329 0,352 0,758 1,054 1,270 1,446 1,475 1,548 1,595 1,601 1,593
2 0,317 0,498 0,393 0,680 0,962 1,178 1,423 1,488 1,599 1,590 1,571 1,578
3 0,283 0,228 0,313 0,562 0,978 1,266 1,393 1,428 1,490 1,552 1,536 1,597
Blanko (DPPH) 1,753 1,636 1,005 1,697 1,824 1,774 1,748 1,834 1,772 1,661 1,717 1,758
Persentase Aktivitas Antioksidan 1 2 3 81,813 81,697 83,661 81,005 71,247 86,836 79,677 77,309 81,928 56,236 60,739 67,552 39,145 44,457 43,533 26,674 31,986 26,905 16,513 17,841 19,573 14,838 14,088 17,552 10,624 7,679 13,972 7,9099 8,1986 10,393 7,5635 9,2956 11,316 8,0254 8,8915 7,7945
Keterangan: 1, 2 dan 3 : Replikasi 1, 2 dan 3 Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan (%) berbagai Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Pacar pada menit ke-30 Konsentrasi (mg/ml) 1 0,5 0,25 0,125 0,0625 0,03125 0,015625 0,0078125 0,0039063 0,0019531 0,0009766 0,0004883
Absorbansi (30’) 1 2 3 0,327 0,336 0,306 0,200 0,199 0,226 0,209 0,203 0,211 0,271 0,229 0,222 0,780 0,618 0,658 1,079 0,952 1,076 1,349 1,314 1,267 1,405 1,422 1,312 1,496 1,514 1,434 1,564 1,557 1,509 1,580 1,557 1,503 1,580 1,555 1,549
Keterangan: 1, 2 dan 3 : Replikasi 1, 2 dan 3
Blanko 1,746 1,633 1,590 1,661 1,818 1,781 1,742 1,835 1,765 1,646 1,708 1,743
Persentase Aktivitas Antioksidan 1 2 3 81,01 80,488 82,23 88,386 88,444 86,876 87,863 88,211 87,747 84,262 86,702 87,108 54,704 64,111 61,789 37,34 44,715 37,515 21,661 23,693 26,423 18,409 17,422 23,81 13,124 12,079 16,725 9,1754 9,5819 12,369 8,2462 9,5819 12,718 8,2462 9,698 10,046
107 LAMPIRAN H Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan (%) berbagai Konsentrasi Quercetin pada menit ke-0 Konsentrasi (mg/ml) 1 0,5 0,25 0,125 0,0625 0,03125 0,015625
1 0,171 0,180 1,179 0,469 0,892 1,175 1,318
Absorbansi (0’) 2 3 0,158 0,177 0,160 0,165 0,172 0,185 0,477 0,417 0,916 0,887 1,245 1,185 1,452 1,387
Blanko (DPPH) 1,753 1,636 1,005 1,697 1,824 1,774 1,748 1,834 1,772 1,661 1,717
Persentase Aktivitas Antioksidan 1 2 3 90,127 90,878 89,781 89,607 90,762 90,473 31,928 90,069 89,319 72,921 72,46 75,924 48,499 47,113 48,788 32,159 28,118 31,582 23,903 16,166 19,919
Keterangan: 1, 2 dan 3 : Replikasi 1, 2 dan 3
Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan (%) berbagai Konsentrasi Quercetin pada menit ke-30 Konsentrasi (mg/ml) 1 0,5 0,25 0,125 0,0625 0,03125 0,015625
Absorbansi (30’) 1 0,173 0,193 0,200 0,198 0,358 0,839 1,125
2 0,175 0,182 0,191 0,206 0,389 0,947 1,271
Keterangan: 1, 2 dan 3 : Replikasi 1, 2 dan 3
3 0,180 0,191 0,209 0,205 0,308 0,892 1,238
Blanko (DPPH) 1,746 1,633 1,590 1,661 1,818 1,781 1,742 1,835 1,765 1,646 1,708
Persentase Aktivitas Antioksidan 1 2 3 89,954 89,837 89,547 88,792 89,431 88,908 88,386 88,908 87,863 88,502 88,037 88,095 79,21 77,41 82,114 51,278 45,006 48,2 34,669 26,19 28,107
108 LAMPIRAN I Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan berbagai Konsentrasi Fraksi no. 65 pada menit ke-0 Konsentrasi (mg/ml) 0,15 0,075 0,0375 0,01875 0,009375 0,0046875 0,0023438 0,0011719 0,0005859 0,0002929 0,0001464 7,324E-05
Absorbansi (0’) 1 1,293 1,56 1,808 1,96 1,744 1,364 1,982 1,922 1,573 1,879 1,813 1,944
2 1,159 1,689 1,699 1,949 2,03 2,019 1,814 1,655 1,658 1,7 1,775 1,854
3 1,238 1,51 1,752 1,841 1,839 1,941 1,729 1,848 1,626 1,879 1,918 1,607
Blanko (DPPH) 1,753 1,636 1,005 1,697 1,824 1,774 1,748 1,834 1,772 1,661 1,717 1,758
Persentase Aktivitas Antioksidan 1 2 3 25,346 33,083 28,522 9,9307 2,4827 12,818 0 1,9053 0 0 0 0 0 0 0 21,247 0 0 0 0 0,1732 0 4,4457 0 9,1801 4,2725 6,1201 0 1,8476 0 0 0 0 0 0 7,2171
Keterangan: 1, 2 dan 3 : Replikasi 1, 2 dan 3
Hasil Perhitungan Persen Aktivitas Antioksidan (%) berbagai Konsentrasi Fraksi no. 65 pada menit ke-30 Konsentrasi (mg/ml) 0,15 0,075 0,0375 0,01875 0,009375 0,0046875 0,0023438 0,0011719 0,0005859 0,0002929 0,0001464 7,324E-05
Absorbansi (0’) 1 2 3 1,124 0,987 1,073 1,435 1,599 1,436 1,758 1,652 1,706 1,942 1,922 1,818 1,745 2,02 1,822 1,362 2 1,939 1,982 1,797 1,721 1,926 1,638 1,837 1,534 1,623 1,587 1,854 1,687 1,871 1,805 1,769 1,903 1,932 1,825 1,6
Keterangan: 1, 2 dan 3 : Replikasi 1, 2 dan 3
Blanko (DPPH) 1,746 1,633 1,590 1,661 1,818 1,781 1,742 1,835 1,765 1,646 1,708 1,743
Persentase Aktivitas Antioksidan 1 2 3 34,727 42,436 37,471 16,667 7,1016 16,513 0 4,0416 0,9238 0 0 0 0 0 0 20,906 0 0 0 0 0,0577 0 4,8499 0 10,918 5,7159 7,7945 0 2,0208 0 0 0 0 0 0 7,0439
109 LAMPIRAN J Cara Perhitungan Kadar Air Ekstrak Replikasi 1 Bobot krus kosong: 22,0931 g
Bobot Krus + isi : 23,0211 g
22,0948 g
23,0081 g
X = 22,0939 g
X= 23,0416 g
Berat ekstrak = 1,0832 g % Kadar air =Berat ekstrak - (Bobot krus + isi - Bobot krus kosong) X100% Berat ekstrak = 1,0832 g – (23,0416 g - 22,0939 g) X 100% 1,0832 g = 15,00 % Replikasi 2 Bobot krus kosong: 21,8074 g
Bobot Krus + isi : 22,7665 g
21,8091 g
22,7529 g
X = 21, 8083 g
X= 22,7597 g
Berat ekstrak = 1,0823 g % Kadar air = Berat ekstrak - (Bobot krus + isi - Bobot krus kosong)X100% Berat ekstrak = 1,0823 g – (22,7597 g - 21, 8083 g) X 100% 1,0823 g = 12,09 %
110 Replikasi 3 Bobot krus kosong: 22,5480 g
Bobot Krus + isi : 23,5117 g
22,5495 g
23,4991 g
X = 22,5487 g
X= 23,5054 g
Berat ekstrak = 1,0405 g % Kadar air = Berat ekstrak - (Bobot krus + isi - Bobot krus kosong)X100% Berat ekstrak = 1,0405 g – (23,5054 g - 22,5487 g) X 100% 1,0405 g = 8,05 %
111 LAMPIRAN K TABEL KORELASI (r) DEGREES OF FREEDOM (DF) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
5 PERCENT
1 PERCENT
.997 .950 .878 .811 .754 .707 .666 .632 .602 .576 .553 .532 .514 .497 .482 .468 .456 .444 .433 .423 .413 .404 .396
1.000 .990 .959 .917 .874 .834 .798 .765 .735 .708 .684 .661 .641 .623 .606 .590 .575 .561 .549 .537 .526 .515 .505
DEGREES OF FREEDOM (DF) 24 25 26 27 28 29 30 35 40 48 50 60 70 80 90 100 125 150 200 300 400 500 1000
5 PERCENT
1 PERCENT
.388 .381 .374 .367 .361 .355 .349 .325 .304 .288 .273 .250 .232 .217 .205 .195 .174 .159 .138 .113 .098 .088 .062
.496 .487 .478 .470 .463 .456 .449 .418 .393 .372 .354 .325 .302 .283 .267 .254 .228 .208 .181 .148 .128 .115 .081
112 LAMPIRAN L Penafsiran spektrum AlCl3 (Markham,1988) Jenis Flavonoid Flavon dan Flavonol
Pergeseran yang tampak Pita I Pita II + 35 sampai 55 nm + 17 sampai 20 nm
Tak berubah
+ 50 sampai 60 nm
Isoflavon, Flavanon dan Dihidroflavonol
Auron dan Khalkon
+ 10 sampai 14 nm + 20 sampai 26 nm
+ 48 sampai 64 nm + 40 nm
Antosianidin dan antosianin
+ 60 sampai 70 nm + 25 sampai 35 nm (pada pH 2-4) Pergeseran lebih besar
Petunjuk penafsiran 5-OH 5-OH dengan oksigenasi pada 6 Mungkin 5-OH dengan gugus prenil pada 6 Mungkin 3-OH (dengan atau tanpa 5-OH) 5-OH (isoflavon) 5-OH (flavanon, dihidroflavonol) 2’-OH (khalkon) 2’-OH (khalkon) dengan oksigenasi pada 3’ 4-OH (auron) O-diOH Banyak o-diOH atau o-diOH (3deoksi antosianidin)
113 LAMPIRAN M Pita Absorpsi Inframerah (Khopkar, 1990) Senyawa Alkohol Asam Amina Primer Amina Sekunder
Frekuensi (cm-1) 3580-3650 2500-2700 ~ 3500 3310-3500
Amida Alkuna
3140-3320 3300
Alkena Aromatik Alkana Aldehida
3010-3095 ~ 3030 2853-2962 2700-2900
Sulfur Alkuna Alkilnitril Iosianat
2500-2700 2190-2260 2240-2260 2240-2275
Arilnitril Diimida Azida Aldehid
2220-2240 2130-2155 2120-2160 1720-1740
CN CO
Keton Asam Karboksilat Ester Asilhalida Amida Oksim β-diketon
1675-1725 1700-1725 2000-2300 1755-1850 1670-1700 1640-1690 1540-1640
C=O C=C N H(b) N=N
Ester Alkena Amina Azo
1650 1620-1680 1575-1650 1575-1630
C NO2 C NO2 COC (CH2)n
Nitro Nitro Aromatik Eter Senyawa Lain
1550-1570 1300-1570 1230-1270 ~ 722
Gugus OH NH
CH
SH CΞC CΞN N=C=N N3
CO