SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI “Pemantapan Riset Kimia dan Asesmen Dalam Pembelajaran Berbasis Pendekatan Saintifik” Program Studi Pendidikan Kimia Jurusan PMIPA FKIP UNS Surakarta, 21 Juni 2014
MAKALAH PENDAMPING
KIMIA LINGKUNGAN
ISBN : 979363174-0
Aktivitas Antibakteri dari Ekstrak Alpinia malaccensis (Burm.f.) Roxb Tita Juwitaningsih1,2, Yana Maolana Syah2 dan Lia Dewi Juliawaty2. 1Jurusan
Kimia FMIPA Universitas Negeri Medan, Indonesia
2Kelompok
Penelitian Kimia Organik Bahan Alam, Program Studi Kimia,Fakultas Matematika dan IlmuPengetahuan Alam, Institut Teknologi Bandung . Indonesia
E-mail:
[email protected]
ABSTRAK Pencarian antibiotik yang berasal dari bahan alam memiliki urgensi yang tinggi dikarenakan banyaknya bakteri yang telah resisten terhadap antibiotik yang sudah ada. Alpinia merupakan salah satu genus yang banyak dimanfaatnya dalam pengobatan tradisional untuk berbagai penyakit. Telah dilakukan uji Aktivitas anti bakteri dari ekstrak aseton bagian rimpang dan biji Alpinia malaccensis, terhadap enam bakteri gram negatif dan dua bakteri gram positif dengan metode mikro dilusi. Aktivitas penghambatan dan membunuh terbaik dari ekstrak rimpang A.malaccensis ditunjukan terhadap V.Cholera dan E. Coli, dengan MIC 37,5 µg/mL dan MBC 75 µg/mL sedangkan Aktivitas penghambatan terbaik dari ekstrak biji A. malaccensis ditunjukan terhadap V.Cholera , E. Coli ,B. subtilis S. Aureus dengan MIC 37,5 µg/mL serta kemampuan membunuh terbaiknya diperlihatkan terhadap E. Coli dengan nilai MBC 37,5 µg/mL. Biji A. malaccensis lebih potensial sebagai sumber senyawa antibakteri.
Kata Kunci : antibakteri , MIC, MBC
Alpinia
mallacensis, akibat
PENDAHULUAN Penyakit infeksi merupakan salah satu penyakit yang paling banyak diderita oleh masyarakat,
dan
telah
menjadi
kemprihatinan dunia [1] , bahkan penyakit
rimpang, infeksi
biji,, ditenggarai
Aktivitas telah
menyebabkan 50% kematian manusia di negara-negara tropis termasuk Indonesia [5]. Upaya-upaya untuk mengatasi hal tersebut telah dilakukan, dan salah satunya adalah dengan pengobatan menggunakan
SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI 495 ISBN : 979363174-0
obat-obatan antimikroba atau antibiotik.
(analgetik),
Namun
meluruhkan kencing (diuretik), obat jamur,
kegagalan
pengobatan
muncul
menghilangkan
akibat bakteri yang telah resisten terhadap
menyegarkan
antibiotik [1],. Oleh karenanya penelitian
lambung, dan meningkatkan nafsu makan
pencarian
[4, 10].
obat-obatan
baru
mengatasi mikroba, terutama resisten
terhadap
untuk
yang telah
antibiotik
terus
berkembang.
obat
berbagai
memperkuat
Adanya efek farmakologi tersebut yang
membuat
genus
Alpinia
telah
digunakan sebagai obat tradisional yang
Alam merupakan salah satu sumber senyawa
(stimulan),
kembung,
yang
senyawa
obat
menakjubkan, telah
berhasil
banyak dipraktekan dan menjadi budaya di Indonesia dalam bentuk ramuan jamujamuan, meskipun belum diteliti secara
diisolasi dari bahan alam seperti benzoin
seksama.
yang diisolasi dari Styrax tonkinensis yang
dimaksudkan untuk melaporkan pengaruh
digunakan untuk desinfektan mulut dan
ekstrak aseton dari Alpinia malaccensis
emetin dari Psychotria ipecacuanha untuk
sebagai
pengobatan
disentri.
pendekatan untuk memperoleh senyawa-
penemuan
obat-obatan
[1].
Sejumlah
salah
satunya
dimulai dari etnobotanikal. (pemakaian oleh masyarakat untuk pengobatan tradisional), dimana
tanaman
menunjukkan
tersebut
pengaruhnya
telah terhadap
berbagai bakteri phatogen, dan sejumlah besar dari tanaman yang digunakan untuk pengobatan
tradisional
tersebut
belum
diteliti secara ilmiah. Salah satu genus famili Zingiberaceae yang
telah
digunakan
sebagai
obat
tradisional adalah Alpinia. Di Indonesia
Oleh
bentuk
karena
itu
dukungan
tulisan
ilmiah
ini
dan
senyawa yang bersifat antimikroba METODE PENELITIAN Bahan yang digunakan rimpang dan biji tumbuhan A. Malaccensis yang diambil dari Kebun Raya Bogor, sampel diidentifikasi di Herbarium Bogoriense Bogor. Pelarut yang digunakan aseton, DMSO, aquades media
Mueller Hinton Agar p.a (MHA) dan Mueller Hinton Broth p.a ( MHB), NaCl, , isolat bakteri dan mikroplat. Alat yang digunakan rotary evaporator,
Alpinia dikenal dengan sebutan ‘lengkuas’
Alat-alat gelas yang umum digunakan di
yang memiliki
labolatorium dan Microplate spectrofotometer
Alpinia
lebih dari 230 spesies.
sering digunakan sebagai obat
tradisional
untuk
mengobati
Bio-Rad.
penyakit
seperti : diare, disentri, panu, kudis, bercakbercak kulit dan tahi lalat, menghilangkan
Uji antibakteri
bau mulut, dan sebagainya. Alpinia memiliki efek farmakologis di antaranya menetralkan racun
(antitoksik),
(antipiretik),
menurunkan
menghilangkan
rasa
panas sakit
Uji antibakteri dilakukan secara in vitro dengan metode mikrodilusi menggunakan standar CLSI [2]. Kultur bakteri Escherichia coli, Enterobacter
SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI 496 ISBN : 979363174-0
aerogenes, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella thypii, Shigella dysentriae, Vibrio cholereae, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus dan Streptococcus sp., diperoleh dari Laboratorium mikrobiologi POLTEKES Bandung. Pembanding yang digunakan adalah amoxycilin.
HASIL
DAN
PEMBAHASAN
Ekstrak aseton rimpang dan biji A. malaccencis
memperlihatkan
aktivitas
antibakteri dengan kisaran MIC antara 37,5 – 75 g/mL dan MBC antara 37,5 – >150 g/mL terhadap bakteri yang diujikan
Penentuan MIC (minimum inhibitory concentration)
Minimum Concentration (MBC)
ini
sejalan
dengan
penelitian-penelitian
sebelumnya yaitu ekstrak dari spesies-
Ekstrak rimpang dan biji masing masing sebesar 6 mg dilarutkan dalam 10 mL DMSO diperoleh konsentrasi 600 µg/mL. Larutan ekstrak sebesar 200 µL ditambahkan ke dalam mikroplat yang telah berisi 200 µL media MHB. Selanjutnya dilakukan pengenceran untuk masingmasing lubang sampai semua lubang terisi 200 µL campuran media dan sampel. Kemudian dimasukkan 10 µL kultur bakteri yang telah diinkubasi pada suhu 37o C dan telah dilarutkan dalam larutan NaCl 0,9%. Kontrol positif menggunakan satu lubang yang hanya berisi sampel dan media. Mikroplat yang telah berisi kontrol positif, sampel dan bakteri uji diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 37o C. Penentuan nilai MIC dilakukan dengan mengamati pertumbuhan bakteri menggunakan spectrofotometer reader (universal microplate reader) pada panjang gelombang 600 nm. Uji bakteri dilakukan pengulangan secara duplo,.
Penentuan
seperti terlihat pada tabel 1 dan tabel 2. Hal
Bactericidal
Untuk menentukan MBC semua larutan uji yang tidak menunjukkan adanya pertumbuhan mikroba pada tahap 2, diinokulasi ke dalam media agar MHA pada suhu 37oC selama 24 jam. Konsentrassi terrendah dari. larutan uji yang dapat membunuh mikroba dinyatakan sebagai MBC.
spesies
genus
alpinia
seperti
(A.
galanga(Linn) Wild [3,6,7, 8,]. A. calcarata Rosc,
A.
allunghas
[9].
Memperlihat
aktivitas antibakteri Ekstrak rimpang A. malaccensis lebih sensitif terhadap bakteri gram negatif yang ditunjukan terhadap MIC 37,5
oleh
aktivitas
terbaiknya
V.Cholera dan E. Coli, dengan g/m, meskipun nilai MICnya
masih lebih besar
apabila dibandingkan
dengan antibiotik amoxycilin. Kedua jenis bakteri tersebut baru
terbunuh pada
konsentrasi yang lebih tinggi yaitu pada 75 g/mL. Hal ini sejalan dengan penggunaan rimpang alpinia untuk pengobatan sakit perut oleh masyarakat di Cina dan Thailan [11]. Ekstrak biji memperlihatkan aktivitas antibakteri baik terhadap bakteri gram negatif maupun bakteri gram positif yaitu V.Cholera dan E. Coli, S. Aureus dan B. Subtilis dengan MIC 37,5 g/mL. Nilai MIC tersebut masih lebih besar dibandingkan terhadap nilai MIC antibiotik amoxycilin. Sedangkan nilai MBC terbaik dari ekstrak biji ditunjukkan terhadap bakteri E. Coli yang akan terbunuh pada konsentarsi 37,5 g/mL. V.Cholera dan, S. Aureus baru terbunuh pada konsentrasi yang lebih tinggi yaitu pada 75 g/mL. sedangkan pada B. Subtilis akan terbunuh
SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI 497 ISBN : 979363174-0
pada konsentasi lebih tinggi dari 150 g/mL. Ekstrak biji A. malaccencis lebih berpotensi sebagai sumber senyawa antibakteri.
KESIMPULAN Ekstrak
Rimpang
A.malaccensis
menunjukkan aktivitas penghambatan dan membunuh terbaik terhadap V.Cholera dan E. Coli, dengan MIC 37,5 µg/mL dan MBC 75
µg/mL
sedangkan
Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically, Approved Guideline,” Wayne, PA, 2003
[3] Habsah ,M., Amran M ., Mackeen M.M Lajis N.H , Kikuzaki H.,Nakatani N,. Rahman A.A ,Ghafar ,. Ali A.M, (2000), Screening of Zingiberaceae Extracts for Antimicrobial and Antioxidant Activities, Journal of Ethnopharmacology, 72 , 403–410.
aktivitas
penghambatan terbaik dari ekstrak biji A. malaccensis ditunjukan terhadap V.Cholera
[4]
, E. Coli ,B. subtilis S. Aureus dengan MIC 37,5 µg/mL serta kemampuan membunuh
Hariana, A., 2004, Tumbuhan Obat dan khasiatnya, Penebar Swadaya, Jakarta
terbaiknya diperlihatkan terhadap E. Coli dengan nilai MBC 37,5 µg/mL. Biji A. malaccensis
lebih
potensial
sebagai
sumber senyawa antibakteri.
[5] Mahady, G.B. (2005). Medicinal plants for the prevention and treatment of bacterial infections, Curr Pharm,11(19),2405-2427.
UCAPAN TERIMA KASIH Ucapan terimakasih disampaikan kepada Pak Aulia dan Pak Harto dari Kebun Raya Bogor atas pengumpulan dan identifikasi sampel, juga kepada Dirjen Dikti atas Bantuan Dana Penelitian Desentralisasi Hibah Fundamental.
DAFTAR RUJUKAN [1] Bhunia, D. and Mondal, A.K, 2012, Antibacterial Activity of Alpinia L. (Zingiberaceae) from Sntal and Lodha Tribal Areas of Paschim Medinipur District in Eastern India, Advances In Bioresearch, Volume 3, Issue 1, March 2012: 54 – 63
[2]
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), “Document M7-A6,
[6]
Niyomkam, P., Kaewbumrung, S., Kaewnpparat, S., Panichayupakaranant, P.,(2010), Antibacterial activity of Thai herbal extracts on acne involved microorganism, Pharmaceutical Biology, 48 (4), pp. 375-380
[7] Oonmetta A,J.,Suzuki,T., Gasaluck,P., Eumkeb.G., 2006, Antimicrobial properties and action of galangal Alpinia galanga Linn.) on Staphyloccus aureus,LWT 39, 12141220.
[8] Rao, K., Ch, B., Narasu, L.M., Giri, A.,2010, Antibacterial Activity of Alpinia galanga (L) Willd Crude
SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI 498 ISBN : 979363174-0
Extracts, Applied Biochemistry and Biotechnology, 162 (3), pp. 871-884. [9] Robinson, JP., Balakrishnan, V., Raj, J.R., Brito, S.J.,2009, Antimicrobial Activity of Alpinia calcarata Rosc. And Characterization of New α, Unsaturated Carbonyl Compound, Advances in Biological Research 3 (5-6): 185-187
TANYA JAWAB Nama penanya
: Yuswan M
Nama pemakalah
: Tita
Juwitaningsih Pertanyaan Mengapa
mengestrak
dengan
menggunakan aseton? Jawaban Digunakan
[10] Victório, C.P, (2011), Therapeutic value of the genus Alpinia,Zingiberaceae, Journal of Pharmacognosy 21(1): 194-201
:
: aseton
karena
tidak
ingin
senyawa tanin ikut terambil saat maserasi. Jika dipakai metanol, senyawa tanin akan ikut terambil dalam hasil maserasi Nama penanya
: Gede Agus Beni
Widana [11] Yang, X., and Eilerman, R. G. (1999), Pungent principle of Alpinia galangal (L.) Swartz and its application, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 47, 1657 1662
Pertanyaan
:
Mengapa digunakan kontrol Amoksisilin sebagai standar Antibiotik ? Jawaban
:
Karena Amoksisilin merupakan antibiotik yang berspektrum luas
SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI 499 ISBN : 979363174-0
LAMPIRAN Tabel 1. Nilai Minimum Inhibitory Concentration (µg/mL) (MIC) dari Ekstrak Rimpang dan Biji A. Malaccencis terhadap Beberapa Bakteri Patogen MIC
Rimpang
Biji
Amoxycilin
V.Cholera
37,5
37,5
6,25
S.Typhii
75
75
3,1
S. Aureus
75
37,5
0,7
E. aerogenes
75
75
3,1
S. dysentriae
75
75
25
E. coli
37,5
37,5
6,25
B. subtilis
75
37,5
25
P aeruginosa
75
75
25
Tabel 2. Nilai Minimum Bactericidal Concentration (µg/mL) (MBC) dari Ekstrak Rimpang dan Biji A. Malaccencis terhadap Beberapa Bakteri Patogen
MBC
Rimpang
Biji
Amoxycilin
V.Cholera
75
75
6,25
S.Typhii
150
150
3,1
S. Aureus
75
75
0,7
E. aerogenes
150
> 150
3,1
S. dysentriae
150
150
25
E. coli
75
37,5
6,25
B. subtilis
> 150
> 150
25
P aeruginosa
75
75
25
SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA VI 500 ISBN : 979363174-0
